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【免疫球蛋白】

免疫球蛋白：指具有抗體活性的動(dòng)物蛋白。主要存在于血漿中，可溶性免疫球蛋白存在于體液中，參與體液免疫 ，也見(jiàn)于其他組織和一些分泌液中。人血漿內(nèi)的免疫球蛋白大多數(shù)存在于丙種球蛋白（γ-球蛋白）中。免疫球蛋白可以分為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五類。

【IgG生理作用】

人體血清免疫球蛋白IgG是初級(jí)免疫應(yīng)答中最持久、最重要的抗體，它僅以單體形式存在。大多是抗菌性、抗毒性和抗病毒抗體屬于IgG，它在抗感染中起到主力軍作用，它能夠促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞的吞噬作用（調(diào)理作用），中和細(xì)菌毒素的毒性（中和毒素）和病毒抗原結(jié)合使病毒失去感染宿主細(xì)胞的能力（中和病毒）。IgG 在機(jī)體合成的年齡要晚于IgM，在出生后第3 個(gè)月開(kāi)始合成，3-5 歲接近成年人水平。它是唯一能通過(guò)胎盤(pán)的Ig，在自然被動(dòng)免疫中起重要作用。此外，IgG 還具有調(diào)理吞噬和結(jié)合SPA等作用。

    以下是賽智科技利用STI501高效液相色譜儀對(duì)豬血中免疫球蛋白IgG進(jìn)行的HPLC檢測(cè)方案。

    （本應(yīng)用方案請(qǐng)勿轉(zhuǎn)載，侵權(quán)必究）

1、儀器與試劑

  1.1儀器、設(shè)備

  STI501高效液相色譜儀

  蛋白柱

  分析天平

  PH計(jì)

  容量瓶

  針頭過(guò)濾器

  微孔濾膜：0.45μm

  1.2試劑

  磷酸二氫鉀（AR）

  磷酸氫二鉀（AR）

2、供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備

對(duì)照品溶液的制備   取IgG標(biāo)準(zhǔn)品0..01g，用流動(dòng)相A溶解并定容至10.0ml，搖勻，即得標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，濃度為1mg/ml;取適量該儲(chǔ)備液用流動(dòng)相A稀釋成含IgG0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)系列，臨用時(shí)配制。

供試品溶液的制備  稱取一定量的血漿蛋白粉試樣約0.1g于容量瓶中，用流動(dòng)相A稀釋至25.0ml，搖勻，經(jīng)0.45um微孔濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣分析。

3、色譜條件

  色譜柱：蛋白柱

  流動(dòng)相：流動(dòng)相A:PH6.5，0.05mol/l磷酸鹽緩沖液

  流動(dòng)相B：PH2.5，0.05mol/l甘氨酸鹽緩沖液

  梯度洗脫程序見(jiàn)下表

  波長(zhǎng)：280nm

  流速：0.4mL/min

  進(jìn)樣量：20ul

  溫度：室溫

梯度洗脫程序

4、測(cè)定法

  分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得

5、譜圖